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Cellule (biologie)

4. Méthodes d'étude de la cellule in vitro

4.1. Microscopie

La microscopie optique (résolution de ± 0,25 µm en lumière visible) permet l'observation de la structure des cellules eucaryotes.

La microscopie électronique (résolution de quelques angströms) révèle l'ultrastructure de celles-ci et permet une observation plus poussée de la structure des cellules procaryotes comme eucaryotes.

4.2. Marquage de molécules

Structure de la GFP.

Structure de la GFP.

(Crédit : Richard Wheeler)

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Pour étudier l'organisation subcellulaire des cellules au microscope, les tissus peuvent, en fonction de la méthode choisie, être vivants, ce qui permet une observation dynamique, ou fixés et préparés en coupes histologiques, ce qui permet en général une observation plus précise, mais figée et ponctuelle.

Localisation subcellulaire par l'utilisation de gènes rapporteurs tels que la GFP (green fluorescing protein) et la luciférase, par immunocytochimie, ou grâce à des molécules radioactives.

Différentes colorations, vitales ou non, permettent l'observation des structures au microscope optique : rouge neutre pour les vacuoles, violet dahlia ou cristal pour le noyau…

4.3. Étude des constituants cellulaires

Isolement de structures : par choc osmotique, ou grâce à des détergents puis par centrifugation.

Purification de protéines : par dialyse, chromatographie, électrophorèse…


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Catégorie : Cellule

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